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CaracterizaĆ§Ć£o de genes que codificam para beta-lactamases de espectro alargado em Enterobacteriaceae de origem hospitalar
| dc.contributor.advisor | Machado, Elisabete | por |
| dc.contributor.author | GonƧalves, Teresa Maria Pinto | por |
| dc.date.accessioned | 2011-01-19T10:22:15Z | por |
| dc.date.accessioned | 2011-10-25T15:12:31Z | |
| dc.date.available | 2011-01-19T10:22:15Z | por |
| dc.date.available | 2011-10-25T15:12:31Z | |
| dc.date.issued | 2010 | por |
| dc.description | Monografia apresentada Ć Universidade Fernando Pessoa para obtenĆ§Ć£o do grau de Licenciada em CiĆŖncias FarmacĆŖuticas | por |
| dc.description.abstract | Os antibiĆ³ticos do grupo dos Ī²-lactĆ¢micos encontram-se entre os mais utilizados no tratamento de infecƧƵes causadas por Enterobacteriaceae. Contudo, a produĆ§Ć£o de beta-lactamases de espectro alargado (ESBLs) nestas bactĆ©rias diminui a sua eficĆ”cia clĆnica, restando poucas alternativas terapĆŖuticas, visto que estas bactĆ©rias acumulam frequentemente resistĆŖncia a outras famĆlias de antibiĆ³ticos. A produĆ§Ć£o de ESBLs constitui por isso um dos mecanismos de resistĆŖncia com maior importĆ¢ncia e impacto clĆnico em Enterobacteriaceae. Ć essencial detectar no laboratĆ³rio de microbiologia clĆnica todos os isolados produtores de ESBLs, assim como proceder Ć caracterizaĆ§Ć£o dos genes que codificam para estas enzimas, de forma a detectar precocemente a emergĆŖncia de novos genes de resistĆŖncia e determinar os genes que se encontram mais disseminados entre diferentes espĆ©cies bacterianas. Em Portugal a ocorrĆŖncia, diversidade e relevĆ¢ncia clĆnica das ESBLs sĆ£o ainda pouco estudadas, existindo apenas relatos esporĆ”dicos em hospitais especĆficos ou estudos efectuados em perĆodos de tempo relativamente curtos. MudanƧas na epidemiologia das ESBLs impƵem novas abordagens terapĆŖuticas e de controlo da infecĆ§Ć£o, justificando a sua vigilĆ¢ncia periĆ³dica e o presente estudo. Assim, com esta monografia pretendeu-se investigar a ocorrĆŖncia e a diversidade de genes que codificam para ESBLs (blaESBL) em Enterobacteriaceae isoladas de um hospital PortuguĆŖs entre Junho de 2006 e Junho de 2007, comparando com dados de anos anteriores (2002-2004), assim como avaliar a coresistĆŖncia a antibiĆ³ticos nĆ£o Ī²-lactĆ¢micos nos isolados produtores de ESBLs. Para isso, foram utilizados mĆ©todos universalmente aceites para a identificaĆ§Ć£o das espĆ©cies e avaliaĆ§Ć£o da susceptibilidade a antibiĆ³ticos. A caracterizaĆ§Ć£o de ESBLs incluiu a realizaĆ§Ć£o do teste do duplo sinergismo e a identificaĆ§Ć£o de genes blaESBL (blaTEM/blaSHV/blaCTX-M) por PCR e sequenciaĆ§Ć£o. A presenƧa do gene blaOXA-1 e qepA entre os isolados produtores de ESBLs foi tambĆ©m pesquisada por PCR. A expressĆ£o de ESBLs foi observada em 5% (81/1486) dos isolados clĆnicos analisados, os quais foram identificados como Escherichia coli (n=48), Enterobacter cloacae (n=14), Klebsiella pneumoniae (n=10), Klebsiella oxytoca (n=4), Morganella morganii (n=2), Enterobacter asburiae (n=1), Proteus mirabilis (n=1) e Serratia marcescens (n=1). As ESBLs detectadas incluĆram representantes de enzimas do tipo TEM (18/81, 22%), SHV (18/81, 22%) e CTX-M (38/81, 47%), correspondendo a oito tipos de ESBLs distintos: TEM (-10, -52, -116), SHV (-12, -64) e CTX-M (-14, -15, -32). As ESBLs mais comuns foram CTX-M-15 (35/81, 43%) identificada em E. coli, e SHV-12 (17/81, 21%) detectada em diferentes espĆ©cies. blaOXA-1 e blaTEM-1 foram detectadas na maioria dos isolados produtores de CTX-M-15 (20/32, 63%). NĆ£o foi detectada a presenƧa do gene qepA entre as Enterobacteriaceae produtoras de ESBLs. A co-resistĆŖncia a antibiĆ³ticos nĆ£o Ī²-lactĆ¢micos foi frequentemente observada, maioritariamente a tetraciclinas (86%), canamicina (85%), gentamicina (78%), tobramicina (77%), estreptomicina (61%), ciprofloxacina (65%) e sulfonamidas (59%). Conclui-se que ocorreu um aumento na ocorrĆŖncia e na diversidade de ESBLs e de espĆ©cies produtoras de ESBLs no hospital analisado. CTX-M-15 e SHV-12 foram os tipos de ESBLs mais frequentes, tendo sido a espĆ©cie E. coli a mais comummente identificada como produtora de ESBLs. A disseminaĆ§Ć£o de clones e plasmĆdeos que albergam estas ESBLs e que conferem resistĆŖncia a antibiĆ³ticos de outras famĆlias parecem estar a contribuir para este cenĆ”rio, embora estudos moleculares mais aprofundados devam ser realizados para confirmar o seu envolvimento na situaĆ§Ć£o epidemiolĆ³gica actual. Ī²-lactams are among the most widely used antibiotics to treat infections caused by Enterobacteriaceae. However, production of extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) reduces their clinical efficacy, leaving few therapeutic alternatives, since these bacteria often accumulate resistance genes to antibiotics of other groups. Therefore, production of ESBLs constitutes one of the mechanisms of resistance with greater importance and clinical impact in Enterobacteriaceae. It is essential to detect in the clinical microbiology laboratory all isolates producing ESBLs, as well as to characterize the genes coding for these enzymes, in order to early detect the emergence of new resistance genes and determine the genes that are most widespread among different bacterial species. In Portugal the occurrence, diversity and clinical significance of ESBLs are still poorly studied, with only sporadic reports on individual hospitals or studies in relatively short time periods. Shifts in ESBL-epidemiology might impose new therapeutic approaches and infection control measures, justifying their periodic surveillance and the present study. The main objectives of this monograph were to investigate the occurrence and diversity of genes coding for ESBLs (blaESBL) among Enterobacteriaceae recovered at a Portuguese hospital between June 2006 and June 2007, comparing data with previous years (2002-2004), as well as to evaluate the co-resistance to non-Ī²-lactam antibiotics in ESBL-producing isolates. To accomplish these goals, we used standard methods for species identification and evaluation of susceptibility to antibiotics. The characterization of ESBLs included detection of expression by the double disc synergy test and identification of blaESBL genes (blaTEM/blaSHV/blaCTX-M) by PCR and sequencing. The presence of blaOXA-1 and qepA among ESBL-producing isolates was also investigated by PCR. Expression of ESBLs was observed in 5% (81/1486) of the clinical isolates analyzed, which were identified as Escherichia coli (n=48), Enterobacter cloacae (n=14), Klebsiella pneumoniae (n=10), Klebsiella oxytoca (n=4), Morganella morganii (n=2), Enterobacter asburiae (n=1), Proteus mirabilis (n=1) and Serratia marcescens (n=1). The ESBLs detected included enzymes representatives of TEM- (18/81, 22%), SHV- (18/81 22%) and CTX-M-types (38/81, 47%), corresponding to eight different types of ESBLs: TEM (-10, -52, -116), SHV (-12, -64) and CTX-M (-14, -15, -32). The most common ESBLs were CTX-M-15 (35/81, 43%) identified in E. coli, and SHV-12 (17/81, 21%) detected in different species. blaOXA-1 and blaTEM-1 were detected in almost all isolates producing CTX-M-15 (20/32, 63%). The presence of the gene qepA was not detected among Enterobacteriaceae producing ESBLs. Co-resistance to non-Ī²-lactam antibiotics was frequently observed, mostly to tetracycline (86%), kanamycin (85%), gentamicin (78%), tobramycin (77%), streptomycin (61%), ciprofloxacin (65%) and sulfonamides (59%). It is concluded that happened an increase in the occurrence and diversity of ESBLs and ESBLs-producing species in the hospital analyzed. CTX-M-15 and SHV-12 were the most frequent ESBL types and E. coli was the species most commonly identified as ESBL producer. The spread of clones and plasmids harboring ESBLs and conferring resistance to antibiotics of other groups seems to contribute for this scenario, although more detailed molecular studies should be conducted to confirm their involvement in the current epidemiological situation. | por |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10284/1889 | por |
| dc.language.iso | por | por |
| dc.publisher | [s.n.] | por |
| dc.title | CaracterizaĆ§Ć£o de genes que codificam para beta-lactamases de espectro alargado em Enterobacteriaceae de origem hospitalar | por |
| dc.type | bachelor thesis | |
| dspace.entity.type | Publication | |
| rcaap.rights | openAccess | por |
| rcaap.type | bachelorThesis | por |